在生命科學研究里，電子顯微鏡是探索納米世界的“千里眼”。然而傳統(tǒng)制樣要把細胞脫水、包埋、染色，蛋白質、脂質往往皺縮或移位，得到的是“加工后”而非“原生”的照片。徠卡冷凍超薄切片系統(tǒng)與CEMOVIS技術的結合，則像給樣品按下“暫停鍵”，讓科學家第一次在近乎天然的水合狀態(tài)下看清細胞內部。 一、什么是CEMOVIS
CEMOVIS的核心是把含水生物樣品以每秒上萬度的速度投入−180°C的液態(tài)乙烷或丙烷，水分子來不及結晶便形成非晶態(tài)冰，瞬間鎖住細胞骨架、囊泡乃至大分子復合體。隨后，樣品在−160°C的冷凍超薄切片機（如Leica EM FC7）上被切成50–200 nm的“冰膜”，直接轉移到冷凍電鏡（cryo-TEM）中成像，全程不接觸任何化學試劑。
二、冷凍超薄切片系統(tǒng)的關鍵角色
低溫環(huán)境與防震：切片倉通液氮維持−160°C，金剛石刀與樣品臺溫差＜0.1°C，防止熱漂移；主動減震臺把振幅降到納米級。
無應力進給：步進馬達最小進給量0.5 nm，配合離子束減?。蛇x），保證“冰膜”厚度均勻，無壓縮痕。
自動收集：防靜電的冷凍傳送臂把切片“釣”到銅網(wǎng)上，網(wǎng)格化存儲，實現(xiàn)高通量。
三、CEMOVIS帶來的三大突破
原生結構：無需染色，電子密度差異直接反映質量厚度，可量化核糖體、病毒衣殼的分子量。
三維關聯(lián)：連續(xù)切片后，用冷凍電子斷層掃描（cryo-ET）拼接，獲得200 nm厚的細胞三維圖譜，分辨率2–4 nm。
動態(tài)捕捉：結合光-電關聯(lián)（CLEM），先用熒光標記活細胞事件，再快速冷凍，鎖定特定時間點的超微結構。
四、應用實例
HIV-1病毒：CEMOVIS揭示病毒包膜與宿主膜融合瞬間，發(fā)現(xiàn)gp120三聚體呈“閉合-開放”兩種構象，為疫苗設計提供新靶點。
神經元突觸：在−160°C切片中，首測突觸囊泡與質膜間距僅3 nm，說明神經遞質釋放前膜曲率尚未翻轉。
葉綠體：玻璃化切片保留類囊體腔水相，直接看到光系統(tǒng)II放氧復合體的側向異質性，為人工光合研究提供天然模板。
五、挑戰(zhàn)與展望
CEMOVIS對操作者經驗要求高，切片易產生皺褶、刀痕；樣品厚度受限于電子穿透力。最新趨勢是把聚焦離子束（FIB）“銑”出的冷凍薄片與CEMOVIS互補，實現(xiàn)更大體積的無縫成像。隨著冷凍光電關聯(lián)、相位板、直接電子探測器的普及，CEMOVIS正從“看得見”走向“看得準、看得全”，成為連接細胞生物學與結構生物學的橋梁。
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